Barbies zweiter Film führt sie wieder in das Märchenreich: Barbie ist Rapunzel, das Mädchen mit dem wundervollen langen Haar. Doch in unserer Geschichte nimmt die mutige Heldin ihr Leben selbst in die Hand. Zu Beginn leidet Rapunzel als Gefangene der mächten Hexe Gothel unter deren Grausamkeit. Doch sie findet nicht nur selbst einen Weg aus dem verzauberten Turm, sondern ergründet das Geheimnis um ihre verlorenen Eltern und versöhnt zwei verfeindete Königreiche. Und als sie schliesslich mit Hilfe des grantigen, aber gutherzigen Kaninchens Hobie und der jungen lila Drachendame Penelope die grosse Liebe findet, lernt auch die ängstliche Penelope, dass die Macht eines guten Herzens wahre Stärke verleiht.
Rapunzel muss der eifersuchtigen und gemeinen Hexe Gothel dienen und wird von ihr im Zauberwald versteckt. Eines Tages findet Rapunzel ein Kastchen, in dem eine silberne Haarburste versteckt ist. Sie macht sich auf, das Ratsel um diesen Fund zu losen und beginnt dadurch, das Netz aus Tauschungen, das Gothel vor langer Zeit gesponnen hat, zu entwirren ...